细胞培养中添加血清的作用

在细胞培养的过程中,我们会把血清作为一种添加剂加入到培养基当中,从而给细胞提供更好的生长环境。添加血清的培养基培育细胞的效果相较于未添加血清的培养基,可以让细胞活率更高,生长繁殖密度更大,可持续培养时间更长。一般在细胞培养中添加的血清补充剂主要为胎牛血清和新生牛血清,因为其中含有细胞生长需要的各类生长因子。使用血清添加在培养基中,也是因为血清具有促进分化的作用,还具有转运运输的功能,因此在培养基中使用血清就可以起到一个整体优化的作用,提高科研效率。血清中的成分组成十分复杂,已知的成分就有上千种,主要成分主要包括血蛋白、胎球蛋白、纤连蛋白、球蛋白、α—抗胰蛋白酶、转铁蛋白、生长因子、EGF、PDGF、氨基酸、脂肪酸等。血蛋白可以作为载体蛋白携带小分子物质用来维持细胞生长,其中各类蛋白还能起到缓冲pH值等作用。虽然血清作为添加剂是对细胞培养有益的,但是也不可以盲目增加浓度。在一定范围内,增加培养基中的血清浓度,可以提高细胞的分化速度,增加细胞活率,但是血清浓度过高会导致细胞生长状态异常。根据实验数据统计,在培养基中添加5%-20%的血清就可以满足绝大多数细胞培养所需要的营养物质。细胞在含有适宜血清浓度的培养基中生长时,血清中所提供的的生长因子可以维持细胞的快速生长,对于细胞的机械损伤的阻止有一定的作用。有研究表明,培养基中血清含量10%时成纤维细胞形态稳定,增殖速率比较快。当培养基中血清含量达到40%时,就会对细胞产生损害作用,细胞数量出现下降的现象,肝细胞原代培养中,血清浓度达到20%时会对肝细胞造成一定伤害。血清根据来源动物品种不同可分为牛血清、马血清、兔血清等。相较而言,牛血清的来源丰富,目前已经广泛应用于细胞培养。牛血清一般可以分为胎牛血清、新生牛血清和小牛血清,其中胎牛血清的品质最高,因为胎牛从未接触过外界,血清中的有毒物质最少,所以其价格也是比较昂贵的。胎牛血清(Fetal Bovine Serum)也称FBS,一般是指心脏穿刺取血200-240日龄的胎牛,分离血清,过滤除菌制成。胎牛血清是细胞培养中效果较好的天然培养基,可以提供细胞贴壁在培养瓶中所需的因子,还能起到酸碱缓冲作用。

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