国产振动切片机的使用技巧

切片机使用技巧:

先按照操作视频,了解正确使用,收到机器装上刀片和样品即可,如果没有使用经验,可以用琼脂块或者土豆块来做操作热身。对于新鲜动植物组织的切片会碰到两种问题:新鲜样品的安装和切片核心三要素的确定:1刀片角度;2 振动幅度;3 进刀速度。

新鲜样品的安装建议

新鲜软组织先用吸水纸去除表面多余水份,为了最大可能保持样品原有形状,避免变形导致切片不理想。尽量准备一个和样品大小类似的样品槽(可以用琼脂块和块状植物挖槽)或者阻挡物(可以用琼脂块和块状植物挖槽)。

切片核心三要素的确定

首先确定不同样品最佳的切口角度,如果对样品不了解,可以将振幅调大,进刀速度减慢,仔细观察比较不同角度(10°、15°、20°等)哪个角度刀片比较容易切入。确定好角度后,再去调整振幅和进刀速度,新手普遍进刀速度偏快,请稍微耐心点,最后再比较不同振幅和进刀速度得到的切片质量,然后做调整,按照有序步骤反复操作和琢磨几次应该就可以掌握切片要领了。

国产振动切片机主要特点

振动切片机专切新鲜的或经过固定的动、植物标本,切片时组织标本不需冰冻或包埋。为此,样品片避免了冰晶破坏,还能保持样品活性和细胞良好形态。给“免疫细胞化学研究"以及“脊髓和脑薄片的神经生物学研究"提供了良好条件,是当代电镜、解剖、组胚、生理、医院、化工等实验系统理想的快速制样理想切片仪器。该切片机经过中国科学院上海生理研究所、复旦大学、第二军医大学等单位使用证明,该机切固定的脑和脊髓等组织,薄可切到10微米,新鲜的脑、心、肾等组织薄可切到30微米,且切片完整,片面光滑,染色均匀,该机切下的脑薄片,在人工脑脊液中其自发放电可维持12h以上,其主要技术指标达到同外同类产品水平。

用振动切片机(vibratome)一般可以把新鲜组织(不固定、不冷冻)切成50～400μm的厚片,以漂浮法在反应板内进行组织化学或免疫组织化学染色。因组织不冷冻,无冰晶形成也无组织抗原破坏,染色前又避免了组织脱水、透明、包埋等步骤对抗原的损害,故能较好地保留组织内脂溶性物质和细胞膜抗原。振动切片主要用于显示神经系统抗原分布的研究。对于柔软的胚胎脑组织,可用低熔点(45—55℃)10%琼脂糖包埋,振动切片机切成厚片(100—400μm),采用漂浮法在反应板内进行免疫荧光组织化学染色,激光扫描共聚焦显微镜观察。

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